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卫生化学检验:砷,铅,汞,甲醇,游离氢氧化物,镉,锶,总氟,总硒,硼酸和硼酸盐,二硫化硒,甲醛,巯基乙酸,氢醌,苯酚,性激素,防晒剂,防腐剂,氧化型染发剂中染料,氮芥,斑蝥素,α-羟基酸,去屑剂,抗生素,甲硝唑,维生素D2&D3,可溶性锌盐,化妆品抗UVA能力,其他化妆品卫生规范中禁用和限用的物质微生物检验:菌落总数,粪大肠菌群,铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌,霉菌和酵母菌。
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 化妆品微生物检测说明

  化妆品是指以涂擦、喷洒或者其他类似的方法,散布于人体表面任何部位(皮肤、毛发、指甲、口唇等),以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的化学工业产品。

  在正常以及合理的、可预见的使用条件下,化妆品不得对人体健康产生危害。

  化妆品的微生物学质量应符合下列规定:

  眼部化妆品及口唇等黏膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品菌落总数不得>500cfu/ml或500cfu/g。

  其他化妆品菌落总数不得>1000cfu/ml或1000cfu/g。

  每克或每毫升产品中不得检出大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。

  化妆品中霉菌和酵母菌总数不得>100cfu/ml或100cfu/g。

  化妆品的直接接触容器材料必须无毒,不得含有或释放可能对使用者造成伤害的有毒物质。

 

 化妆品微生物如何检测

  化妆品微生物如何检测?简单的实验就能得出结果。

  1、样品采集按无菌方法随机抽取各种品牌牙膏、成人护扶品(膏、霜、洗面奶、爽肤水、粉饼等)、婴幼儿用护扶品(爽身粉、面霜等)。

  2、样品的制备按无菌方法取药粒10g或10ml投入到装有90ml的无菌生理盐水中,摇动至完全溶解,即为1:10样品液,按前述方法相应可制备1:100、1:1000的稀释液。

  2、菌落总数检验将融化并冷至45℃~50℃的营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿,加入约15m营养琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h,为空白对照。

  4、霉菌和酵母菌数的检测取1:10的检液各1mL分别注入2个灭菌平皿内,(若菌量较多时可顺序再做10倍稀释),另取1个灭菌空平皿(作空白对照),每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28℃培养箱,培养3天,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h应及时将此平板取出计数。

 

 实验室化妆品微生物检测样品

  化妆品微生物检测,会涉及到实验室检测样品,样品有哪些形态呢?

  (1)液体样品

  1水溶性的液体样品,量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液

  2油性液体样品,取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在40℃~44℃水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃~44℃水浴中预温),在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的悬液。

  (2)膏,霜,乳剂半固体状样品

  1亲水性的样品,称取10g,加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。取其上清液作为1:10的检液。

  2疏水性样品,称取10g,放到灭菌的研钵中,加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成1:10检液。

  (3)固体样品,称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10的检液。

  如有均质器,上述水溶性膏,霜,粉剂等,可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水,均质1min~2min;疏水性膏,霜及眉笔,口红等,称10g样品,加10mL灭菌液体石蜡,10mL灭菌吐温80,70mL灭菌生理盐水,均质3min~5min。

 

 微生物检测实验步骤

  1、样品采集

  按无菌方法随机抽取各种品牌牙膏、成人护扶品(膏、霜、洗面奶、爽肤水、粉饼等)、婴幼儿用护扶品(爽身粉、面霜等)。

  2、样品预处理

  在化妆品中通常都加入了防腐剂,使化妆品能较长时间使用而不腐败变质,因此在进行化妆品卫生细菌学检验时,必须消除化妆品中的防腐剂,使长期处于濒死状态或半损伤状态的细菌被检出,从而得出正确的检验结果。消除防腐剂抑菌作用的方法,常用的方法有:

  (1)稀释法:用稀释液和培养基将样品稀释到一定浓度,使其抑菌成分的浓度减少到无抑菌作用的程度,再进行检验。

  (2)中和法:在供试液或培养基中加入中和剂,以中和防腐剂的抑菌效果。防腐剂种类不同所用的中和剂亦不同。本实验采用吐温80+卵磷脂来做中和剂。

  3、样品的制备

  (1)液体样品○1水溶性的液体样品,量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液○2油性液体样品,取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL灭菌的吐温80,在40℃~44℃水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃~44℃水浴中预温),在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的悬液。

  (2)膏,霜,乳剂半固体状样品○1亲水性的样品,称取10g,加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。.取其上清液作为1:10的检液。○2疏水性样品,称取10g,放到灭菌的研钵中,加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成1:10检液。

  (3)固体样品,称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10的检液。如有均质器,上述水溶性膏,霜,粉剂等,可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水,均质1min~2min;疏水性膏,霜及眉笔,口红等,称10g样品,加10mL灭菌液体石蜡,10mL灭菌吐温80,70mL灭菌生理盐水,均质3min~5min。

  4、菌落总数检验

  (1)用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面),更换一支吸管,并充分混匀,制成1:100检液,各吸取1mL,分别注入到两个灭菌平皿内。如样品含菌量高,还可再稀释成1:1000,1:10000,……等,每种稀释度应换1支吸管。

  (2)将融化并冷至45℃~50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿,加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置37℃培养箱内培养48h,为空白对照。

  5、霉菌和酵母菌数的检测

  取1:10的检液各1mL分别注入2个灭菌平皿内,(若菌量较多时可顺序再做10倍稀释),另取1个灭菌空平皿(作空白对照),每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28℃培养箱,培养3天,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h应及时将此平板取出计数。

  6、菌落计数方法

  (1)菌落总数技术先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。记下各平皿的菌落数后,求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数.若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,以代表全皿菌落数。

  (2)霉菌和酵母菌菌落计数先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数,求出每个稀释度的平均菌落数。判定结果时,应选取菌落数在20~100个范围之内的平皿计数,乘以稀释倍数后,即为每g(或每mL)检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。每g(或每mL)化妆品含霉菌和酵母菌数以CFU/g(mL)表示。

  7、评定标准

  化妆品的微生物学质量应符合下述规定:

  (1)眼部、口唇、口腔粘膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品细菌总数不得大于500/ml或500/g。

  (2)其它化妆品细菌总数不得大于1000/ml或1000/g。

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